Development of CEL: a low-cost equipment for Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) assays.
DOI:
https://doi.org/10.51723/ccs.v28i01.109Abstract
The Brazilian Health System consists of a set of actions and services that assist the population through strategies aimed at the promotion, protection, and health recovery. One of the highlights is prevention, which includes the diagnosis and early treatment of diseases. The detection and classical identification of pathogens are based on microscopy and culture, however the low sensitivity; the need for trained professionals and adequate infrastructure leads, in some cases, to the failure of the diagnosis and in the delay to start treatment. Objective: to develop CEL, an equipment for LAMP (Loop-Mediated Isothermal Amplification) assays for use in low-resource settings laboratories. Results: Protocols were standardized for five important diseases found in the Amazon region: tuberculosis, malaria, dengue, mayaro and oropouche fevers. The equipment has integrated photometric detection, with the capacity of eight simultaneous reactions, detecting the color change observed in the positive reactions. The results are shown in an easy-to-read alphanumeric display, even for people with no experience with the technique. The results can also be transferred by bluetooth to a smartphone with the CEL App, where it is possible to see the results in a graphical interface. Conclusion: Once CEL is a low-cost device, developed for molecular diagnostics, it can represent an alternative to the expansion of the molecular diagnosis in the services of the primary health attention, allowing higher population access, even in remote areas.
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References
2. Galluzzi L, Magnani M, Saunders N, Harms C, Bruce IJ. Current molecular techniques for the detection of microbial pathogens. Sci Prog. 2007;90(Pt 1):29–50.
3. Gomes Naveca F, Sabidó M, Amaral Pires de Almeida T, Araújo Veras E, Contreras Mejía MDC, Galban E, et al. Etiology of genital ulcer disease in a sexually transmitted infection reference center in Manaus, Brazilian Amazon. Tang J, editor. PLoS ONE. Public Library of Science; 2013;8(5):e63953.
4. Woodford N, Sundsfjord A. Molecular detection of antibiotic resistance: when and where? J Antimicrob Chemother. 2005 Aug;56(2):259–61.
5. Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, Amino N, et al. Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res. Oxford University Press; 2000 Jun 15;28(12):E63.
6. Nagamine K, Hase T, Notomi T. Accelerated reaction by loop-mediated isothermal amplification using loop primers. Mol Cell Probes. 2002 Jun;16(3):223–9.
7. Mori Y, Notomi T. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): a rapid, accurate, and cost-effective diagnostic method for infectious diseases. J Infect Chemother. 2009 Apr;15(2):62–9.
8. Nie X. Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification of DNA for Detection of Potato virus Y. Plant Disease. The American Phytopathological Society; 2005 Jun;89(6):605–10.
9. Tomita N, Mori Y, Kanda H, Notomi T. Loopmediated isothermal amplification (LAMP) of gene sequences and simple visual detection of products. Nat Protoc. 2008;3(5):877–82.
10. Gurukumar KR, Priyadarshini D, Patil JA, Bhagat A, Singh A, Shah PS, et al. Development of real time PCR for detection and quantitation of Dengue Viruses. Virol J. BioMed Central Ltd; 2009;6(1):10.
11. Naveca FG, Nascimento VAD, Souza VC de, Nunes BTD, Rodrigues DSG, Vasconcelos PFDC. Multiplexed reverse transcription real-time polymerase chain reaction for simultaneous detection of Mayaro, Oropouche, and Oropouche-like viruses. Mem Inst Oswaldo Cruz. Fundação Oswaldo Cruz; 2017 Jul;112(7):510–3.
12. Teoh B-T, Sam S-S, Tan K-K, Johari J, Danlami MB, Hooi P-S, et al. Detection of dengue viruses using reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification. BMC Infect Dis. BioMed Central Ltd; 2013;13(1):387.
13. Balne PK, Barik MR, Sharma S, Basu S. Development of a loop-mediated isothermal amplification assay targeting the mpb64 gene for diagnosis of intraocular tuberculosis. J Clin Microbiol. American Society for Microbiology; 2013 Nov;51(11):3839–40.
14. Han E-T, Watanabe R, Sattabongkot J, Khuntirat B, Sirichaisinthop J, Iriko H, et al. Detection of four Plasmodium species by genus- and species-specific loop-mediated isothermal amplification for clinical diagnosis. J Clin Microbiol. 2007 Aug;45(8):2521–8.
15. Goto M, Honda E, Ogura A, Nomoto A, Hanaki K-I. Colorimetric detection of loop-mediated isothermal amplification reaction by using hydroxy naphthol
blue. BioTechniques. 2009 Mar;46(3):167–72.
16. Ferreira MU, Castro MC. Challenges for malaria elimination in Brazil. Malar J. 3rd ed. BioMed Central; 2016 May 20;15(1):284.
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